GB5009.85-2016
|
ID： |
549C27AA22FB4238B273A47BF1B26F9E |
|
文件大小(MB)： |
0.28 |
|
页数： |
11 |
|
文件格式： |
|
|
日期： |
2017-4-7 |
|
购买： |
文本摘录（文本识别可能有误，但文件阅览显示及打印正常，pdf文件可进行文字搜索定位）：
中华人民共和国国家标准,GB5009.85—2016,食品安全国家标准,食品中维生素B2 的测定,2016-12-23发布2017-06-23实施,中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会,国家食品药品监督管理总局发布,GB5009.85—2016,Ⅰ,前 言,本标准代替GB/T5009.85—2003《食品中核黄素的测定》、GB/T9695.28—2008《肉与肉制品,维生素B2 含量测定》、GB/T7629—2008《谷物中维生素B2 测定》和GB5413.12—2010《食品安全国家,标准 婴幼儿食品和乳品中维生素B2 的测定》,本标准与GB/T5009.85—2003相比,主要变化如下:,———标准名称修改为“食品安全国家标准 食品中维生素B2 的测定”;,———增加了高效液相色谱法;,———删除了微生物法,GB5009.85—2016,1,食品安全国家标准,食品中维生素B2 的测定,1 范围,本标准规定了食品中维生素B2 的测定方法,本标准第一法为高效液相色谱法,第二法为荧光分光光度法,适用于各类食品中维生素B2 的测定,第一法 高效液相色谱法,2 原理,试样在稀盐酸环境中恒温水解,调pH 至6.0~6.5,用木瓜蛋白酶和高峰淀粉酶酶解,定容过滤后,滤液经反相色谱柱分离,高效液相色谱荧光检测器检测,外标法定量,3 试剂和材料,除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的一级水,3.1 试剂,3.1.1 盐酸(HCl),3.1.2 冰乙酸(CH3COOH),3.1.3 氢氧化钠(NaOH),3.1.4 三水乙酸钠(CH3COONa3H2O),3.1.5 甲醇(CH3OH):色谱纯,3.1.6 木瓜蛋白酶:活力单位≥10U/mg,3.1.7 高峰淀粉酶:活力单位≥100U/mg,或性能相当者,3.2 试剂配制,3.2.1 盐酸溶液(0.1mol/L):吸取9mL盐酸,用水稀释并定容至1000mL,3.2.2 盐酸溶液(1+1):量取100mL盐酸,缓慢倒入100mL水中,混匀,3.2.3 氢氧化钠溶液(1mol/L):准确称取4g氢氧化钠,加90mL水溶解,冷却后定容至100mL,3.2.4 乙酸钠溶液(0.1 mol/L):准确称取13.60g 三水乙酸钠,加900 mL 水溶解,用水定容至,1000mL,3.2.5 乙酸钠溶液(0.05mol/L):准确称取6.80g三水乙酸钠,加900mL水溶解,用冰乙酸调pH 至,4.0~5.0,用水定容至1000mL,3.2.6 混合酶溶液:准确称取2.345g木瓜蛋白酶和1.175g高峰淀粉酶,加水溶解后定容至50mL,临用前配制,GB5009.85—2016,2,3.2.7 盐酸溶液(0.012mol/L):吸取1mL盐酸,用水稀释并定容至1000mL,3.3 标准品,维生素B2(C17H20N4O6,CAS号:83-88-5):纯度≥98%,3.4 标准溶液配制,3.4.1 维生素B2 标准储备液(100μg/mL):将维生素B2 标准品置于真空干燥器或装有五氧化二磷的,干燥器中干燥处理24h后,准确称取10mg(精确至0.1mg)维生素B2 标准品,加入2mL盐酸溶液,(1+1)超声溶解后,立即用水转移并定容至100mL。混匀后转移入棕色玻璃容器中,在4℃冰箱中贮,存,保存期2个月。标准储备液在使用前需要进行浓度校正,校正方法参见附录A,3.4.2 维生素B2 标准中间液(2.00μg/mL):准确吸取2.00mL维生素B2 标准储备液,用水稀释并定,容至100mL。临用前配制,3.4.3 维生素B2 标准系列工作液:分别吸取维生素B2 标准中间液0.25 mL、0.50 mL、1.00 mL、,2.50mL、5.00mL,用水定容至10mL,该标准系列浓度分别为0.05μg/mL、0.10μg/mL、0.20μg/mL、,0.50μg/mL、1.00μg/mL。临用前配制,4 仪器和设备,4.1 高效液相色谱仪:带荧光检测器,4.2 天平:感量为1mg和0.01mg,4.3 高压灭菌锅,4.4 pH 计:精度0.01,4.5 涡旋振荡器,4.6 组织捣碎机,4.7 恒温水浴锅,4.8 干燥器,4.9 分光光度计,5 分析步骤,5.1 试样制备,取样品约500g,用组织捣碎机充分打匀均质,分装入洁净棕色磨口瓶中,密封,并做好标记,避光存,放备用,称取2g~10g(精确至0.01g)均质后的试样(试样中维生素B2 的含量大于5μg)于100mL具塞,锥形瓶中,加入60mL的0.1mol/L盐酸溶液,充分摇匀,塞好瓶塞。将锥形瓶放入高压灭菌锅内,在,121℃下保持30min,冷却至室温后取出。用1mol/L氢氧化钠溶液调pH 至6.0~6.5,加入2mL混,合酶溶液,摇匀后,置于37℃培养箱或恒温水浴锅中过夜酶解。将酶解液转移至100mL容量瓶中,加,水定容至刻度,用滤纸过滤或离心,取滤液或上清液,过0.45μm 水相滤膜作为待测液,注:操作过程应避免强光照射,不加试样,按同一操作方法做空白试验,5.2 仪器参考条件,a) 色谱柱:C18柱,柱长150mm,内径4.6mm,填料粒径5μm,或相当者;,GB5009.85—2016,3,b) 流动相:乙酸钠溶液(0.05mol/L)-甲醇(65∶35);,c) 流速:1mL/min;,d) 柱温:30℃;,e) 检测波长:激发波长462nm,发射波长522nm;,f) 进样体积:20μL,5.3 标准曲线的制作,将标准系列工作液分别注入高效液相色谱仪中,……
……