GB5009.25-2016
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ID： |
821B02BA3B85429C9C17DB4500685914 |
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文件大小(MB)： |
0.38 |
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页数： |
15 |
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文件格式： |
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日期： |
2017-4-7 |
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中华人民共和国国家标准,GB5009.25—2016,食品安全国家标准,食品中杂色曲霉素的测定,2016-12-23发布2017-06-23实施,中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会,国家食品药品监督管理总局发布,GB5009.25—2016,Ⅰ,前 言,本标准代替GB/T5009.25—2003《植物性食品中杂色曲霉素的测定》和SN/T2483—2010《进出口,粮谷中柄曲霉素含量检测方法 液相色谱法》,本标准与GB/T5009.25—2003相比,主要变化如下:,———标准名称修改为“食品安全国家标准 食品中杂色曲霉素的测定”;,———增加了液相色谱-串联质谱法;,———增加了液相色谱法,GB5009.25—2016,1,食品安全国家标准,食品中杂色曲霉素的测定,1 范围,本标准规定了液相色谱-串联质谱法和高效液相色谱法测定杂色曲霉素的测定方法,本标准适用于大米、玉米、小麦、黄豆及花生中杂色曲霉素的测定,第一法 液相色谱-串联质谱法,2 原理,试样中的杂色曲霉素乙腈-水溶液提取,经涡旋、超声、离心,取上清液经稀释,通过固相萃取柱或免,疫亲和柱净化、浓缩、甲醇-水溶液定容、微孔滤膜过滤,液相色谱分离,电喷雾离子源离子化,多反应离,子监测检测,同位素内标法定量,3 试剂和材料,除非另有说明,本方法使用的试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的一级水,3.1 试剂,3.1.1 乙腈(CH3CN):色谱纯,3.1.2 甲醇(CH3OH):色谱纯,3.1.3 氯化钠(NaCl),3.1.4 磷酸氢二钠(Na2HPO4),3.1.5 磷酸二氢钾(KH2PO4),3.1.6 盐酸,3.1.7 氯化钾(KCl),3.2 试剂配制,3.2.1 乙腈-水溶液(80+20):取800mL乙腈,加200mL水,混匀,3.2.2 乙腈-水溶液(40+60):取400mL乙腈,加600mL水,混匀,3.2.3 甲醇-水溶液(40+60):取400mL甲醇,加600mL水,混匀,3.2.4 甲醇-水溶液(70+30):取700mL甲醇,加300mL水,混匀,3.2.5 磷酸盐缓冲溶液(以下简称PBS):称取8.0g氯化钠,1.2g磷酸氢二钠(或2.92g十二水磷酸氢,二钠),0.2g 磷酸二氢钾,0.2g 氯化钾,用900 mL 水溶解,用盐酸调节pH 至7.4,用水定容,至1000mL,GB5009.25—2016,2,3.3 标准品,3.3.1 杂色曲霉素标准品(C18H12O6,CAS号:10048-13-2):纯度≥99%,或经国家认证并授予标准物,质证书的标准物质,3.3.2 13C18-杂色曲霉素同位素内标:25μg/mL,或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质,3.4 标准溶液配制,3.4.1 标准储备溶液(100μg/mL):准确称取杂色曲霉素标准品1.00mg(准确至0.01mg),用甲醇溶,解并定容至10mL。溶液转移至试剂瓶中后,密封后-20℃下保存,保存期6个月,3.4.2 标准工作液(1μg/mL):准确移取1.00mL的杂色曲霉素标准储备溶液至100mL容量瓶中,用,甲醇定容。-20℃下保存,保存期3个月,3.4.3 同位素内标工作液(1.0μg/mL):准确移取杂色曲霉素同位素内标(25μg/mL)0.40 mL 至,10mL容量瓶中,用甲醇定容。-20℃下保存,保存期3个月,3.4.4 标准系列工作溶液:准确移取标准工作液适量至5mL容量瓶中,加入50μL1.0μg/mL的同位,素内标工作液,用甲醇-水溶液(70+30)定容至刻度(含杂色曲霉素浓度为1ng/mL、2ng/mL、,5ng/mL、10ng/mL、20ng/mL、30ng/mL、40ng/mL、50ng/mL系列标准溶液),临用前配制,3.5 材料,3.5.1 免疫亲和柱:柱容量≥600ng(柱容量验证方法参见B.2),3.5.2 固相萃取柱:N-乙烯吡咯烷酮和二乙烯基苯共聚物填料柱(200mg/6mL),或相当者。使用前,分别用5mL甲醇和5mL水活化,3.5.3 微孔滤膜:0.22μm,4 仪器和设备,4.1 液相色谱-串联质谱仪:配电喷雾离子源,4.2 高速粉碎机,4.3 涡旋混合器,4.4 超声波发生器,4.5 天平:感量为0.01g和0.00001g,4.6 离心机:转速≥6000r/min,4.7 固相萃取装置(带真空泵),4.8 氮吹仪,4.9 试验筛:1mm~2mm 孔径,5 分析步骤,5.1 试样制备,样品用高速粉碎机将其粉碎后过1mm~2mm 孔径试验筛,混合均匀后取试样100g用于检测,5.2 试样提取,称取5g均质试样(精确至0.01g)至50mL离心管中(花生和黄豆样品:称取2g均质试样),加入,GB5009.25—2016,3,100μL同位素内标工作液,加入20.0mL乙腈-水溶液(80+20),涡旋混匀后超声10min,在6000r/min下,离心10min,取上清液备用,5.3 净化,5.3.1 固相萃取柱净化,准确移取2.0mL上述上清液用水稀释至8mL待上样,将上样液转移至活化好的固相萃取柱中,控制样液以约3mL/min的速度稳定下滴。上样完毕后,依次加入5mL的乙腈-水溶液(40+60)、5mL的甲醇-水溶液(40+60)淋洗。待淋洗结束后,用真空泵,抽干固相萃取柱,加入6mL乙腈洗脱,控制流速为约3mL/min,用真空泵抽干固相萃取柱,收集洗脱,液。在60℃下用氮气缓缓吹至干,用甲醇-水溶液(70+30)定容至1.0mL,涡旋30s溶解残留物,0.22μm滤膜……
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